Буферы для электрофореза и блоттинга белков

2× Буфер для внесения (SDS-PAGE loading buffer) является стандартным буфером для SDS-PAGE электрофореза. Продукт содержит бромфеноловый синий, который помогает визуализировать ход электрофореза.

Кроме того, продукт содержит восстановитель без запаха вместо дитиотрейтола (DTT) или меркаптоэтанола, что делает процесс внесения белка более безопасным, а растворимость в воде более стабильной.

Характеристики буфера SDS-PAGE loading buffer

• Срок годности – 12 месяцев;
• хранение – при температуре -20℃.

Буфер совместим только с наборами Servicebio для ультрабыстрого приготовления гелей с высоким разрешением с красителями красного/зеленого цвета (арт. G2066-50T, G2067-50T, G2068-50T, G2071-50T, G2072-50T, G2073-50T). Недопустимо смешивать буфер с Трис-глициновым буфером для электрофореза.

Буфер поставляется в виде 25х раствора. Перед применением концентрированный реагент необходимо разбавить чистой водой в 25 раз для получения 1х раствора.

1х раствор для однократного применения, не рекомендуется использовать раствор повторно.

Срок хранения — 1 год при комнатной температуре.

В состав набора для приготовления форезных проб входят пробирка с 8 мл 3-кратного буфера для нанесения образцов на гель и пробирка с 1 мл 30-кратного раствора восстанавливающего агента (дитиотреитол). В состав буфера для нанесения на гель входят Трис-HCl c рН 6,8, SDS, глицерин в качестве утяжеляющего агента и бромфеноловый синий в качестве маркерного красителя. Дитиотреитол восстанавливает дисульфидные группы в составе белка.

Условия хранения — -20 °С.

Буфер для внесения представляет собой 2-кратный концентрированный буфер для внесения на гель с красителем бромфеноловым синим, используемый для стандартного SDS-PAGE электрофореза.

Основными компонентами этого продукта являются буфер Tris-HCl, глицерин, SDS, бромфеноловый синий и восстановитель DTT.

• Условия хранения, ℃ – -20;
• срок годности – 12 месяцев.

Применение:

• Образец белка перемешать с 2-кратным буфером для внесения (восстанавливающим) в том же объемном отношении.
• Поместить образец в металлическую баню или баню с кипящей водой и нагреть в течение 3-5 мин для полной денатурации образца белка.
• Охладить до комнатной температуры и добавить образец на гель.

Бромфеноловый синий используется в качестве красителя для электрофоретического образца невосстановленного образца белка SDS-PAGE.

Основными компонентами этого продукта являются буфер Tris-HCl, глицерин, SDS и бромфеноловый синий.

• Условия хранения, °C — -20;
• срок годности — 12 месяцев.

Применение:

• jбразец белка перемешать с 2-кратным буфером для внесения (невосстанавливающим) в том же объемном отношении.
• Поместить образец в металлическую баню или баню с кипящей водой и нагреть в течение 3-5 мин для полной денатурации образца белка.
• Охладить до комнатной температуры и добавить образец на гель.

Буфер SWE rapid с высоким разрешением, оптимизированный на основе трис-глицинового проточного буфера, подходит для использования с гель-электрофорезом Tris-HCl SDS-PAGE. По сравнению с традиционным буфером Трис-глицина, при использовании этого буфера для электрофореза напряжение можно повышать до 200-250 В, что сокращает время электрофореза до 30 мин и значительно экономит время. Данный оптимизированный буфер разделяет белки на мелкие молекулы (отделяет полосу 10 кДа от полосы 15 кДа) в предварительно окрашенном белковом маркере.

Для приготовления рабочего раствора рекомендуется добавить к порошку 1 л дистиллированной воды.

Характеристики буфера SWE rapid

• Применение – SDS-PAGE электрофорез;
• cрок годности – 12 месяцев;
• хранение – при температуре -20℃.

Трисглициновый буфер для SDS-PAGE 10-кратно концентрированный, подходит для электрофореза белкового геля в системе трис-глицин. Буфер состоит из 250 мМ Трис, 2,5 M глицина и 1% SDS.
Перед использованием следует развести в 10 раз, для этого смешайте 100 мл буфера с 900 мл деионизированной или дистиллированной водой для получения рабочего раствора, состоящего в основном из 25 мМ триса, 250 мМ глицина, 0,1% SDS, pH 8,0-8,6 при 25°C.

Характеристики буфера

• Срок годности 12 месяцев;
• хранение при комнатной температуре.

Основными компонентами буфера являются 20 мМ TRIS и 192 мМ глицин. Для приготовления рабочего раствора рекомендуется добавить к порошку 800 мл воды и 200 мл метанола.

Характеристики буфера переноса для электрофореза

• Применение – WB;
• срок годности – 24 месяца;
• хранение – при комнатной температуре.

Буфер для проведения классического электрофореза белков в полиакриламидном геле (ПААГ) с додецилсульфатом натрия (SDS) для электрофореза в денатурирующих условиях, или без додецилсульфат натрия для нативного электрофореза.

Условия хранения: комнатная температура.

Трис-глициновый буфер без SDS используется для проведения неденатурирующего (нативного) электрофореза в полиакриламидном геле для разделения белков в зависимости от их молекулярного веса и заряда. После добавления 20% метанола буфер трис-глицин-метанол используется для влажного переноса белков на мембрану. Не содержит метанол. Буфер профильтрован через фильтр 0,2 мкм.

• Концентрация — 10-кратный концентрированный раствор;
• состав — 1,92 M глицина, 0,25 М трис;
• условия хранения и транспортировки, °С —15-25, замораживание не допускается.

Приготовление рабочего раствора

Кат. № 12-310024 (10-кратный концентрированный раствор): разбавьте 10-кратный трис-глициновый буфер деионизированной водой (или смесью деионизированной воды и 20% метанола) в пропорции 1:10 (одна часть 10-кратного раствора и 9 частей воды (или 2 части метанола, 7 частей воды). Перемешайте. Раствор в рабочем разведении содержит: 0,192 М глицина, 0,025 М трис, рН 8,2-8,8.

Процедура

Для нативного электрофореза однократный трис-глициновый буфер заливается в камеру для электрофореза. Для переноса используется трис-глицин-метанол, содержащий 20% метанол, в количестве достаточном для покрытия электродов, пропитки мембраны и фильтровальной бумаги.

Буфер для проведения классического электрофореза белков в полиакриламидном геле (ПААГ) с додецилсульфатом натрия (SDS) для электрофореза в денатурирующих условиях, или без додецилсульфат натрия для нативного электрофореза.

Условия хранения: комнатная температура.

Трис-глициновый буфер с SDS используется для разделения белков по молекулярному весу в полиакриламидном геле. Буфер также может использоваться для блокировки мембран 5% обезжиренным молоком для вестерн-блоттинга. Буфер профильтрован через фильтр 0,2 мкм.

• Концентрация — 10-кратный концентрированный раствор;
• состав — 1,92 M глицина, 0,25 М трис, 1% SDS;
• условия хранения и транспортировки, °С —15-25, замораживание не допускается.

Приготовление рабочего раствора

Кат. № 12-310025 (10-кратный концентрированный раствор): разбавьте 10-кратный трис-глициновый буфер c SDS деионизированной водой в пропорции 1:10 (одна часть 10-кратного раствора и 9 частей воды. Перемешайте. Раствор в рабочем разведении содержит: 0,192 М глицина, 0,025 М трис, 0,1% SDS, рН 8,2-8,8.

Процедура

Для денатурирующего электрофореза однократный трис-глициновый буфер с SDS заливается в камеру для электрофореза. Рабочие условия: напряжённость поля 10 В/см (150 вольт для мини-вертикальных установок для гель-электрофореза).