Ферменты

Щелочная фосфатаза катализирует отщепление 5’- и 3’-фосфатных групп от ДНК, РНК и нуклеотидов, а также от белков.

Термочувствительная фосфатаза FastAp активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах. Она дефосфорилирует все типы концов ДНК (липкие и тупые) в течение 10 минут при +37^оС и инактивируется при +75^оС в течение 5 минут, поэтому не требуется очистка реакционной смеси перед лигированием.

Особенности щелочной фосфатазы FastAp:

• Рекомбинантный белок;
• быстрое дефосфорилирование - 10 минут;
• быстрая инактивация - 5 минут;
• можно использовать для одновременного расщепления и дефосфорилирования векторной ДНК;
• активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах;
• дефосфорилирует белки;
• используется для очистки ПЦР-смесей совместно с ExoI.

Области применения:

• Дефосфорилирование векторной ДНК при клонировании;
• очистка ПЦР-продуктов из реакционных смесей перед секвенированием;
• дефосфорилировнание 5’-концов ДНК перед мечением полинуклеотидкиназой Т4;
• другие экперименты, связанные с дефосфорилированием нуклеиновых кислот;
• дефосфорилирование белков.

Важно!

Связывание фосфатазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

Условия хранения: -20^оС